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リン酸カルシウム共沈殿法リン酸カルシウム共沈殿法は、成分が入手しやすく、安価であるため、1970年代初期に導入されて以来（GrahamandvanderEb,1973）、よく用いられているトランスフェクション法です。さらに、この手法はマスターしやすく、多くのタイプの培養細胞に効果的であり、様々な培養細胞タイプの一過性および安定トランスフェクションに使用可能です。しかしながら、リン酸カルシウム共沈殿法は、pH、温度、およびバッファー塩濃度の微小な変化に対する感受性が高いため変動しやすい傾向があり、また多くのタイプの細胞の培養、特に初代細胞の培養において毒性を持つ可能性があります。加えて、全ての動物に対するinvivo核酸導入が適さず、脂質媒介性トランスフェクションなどの他の化学的トランスフェクション法に比べ...リン酸カルシウム共沈殿法
安定トランスフェクションのページを更新安定トランスフェクションでは、外来DNAは細胞内ゲノムに組み込まれるか、エピソーム性プラスミドとして維持されます。一過性トランスフェクションとは異なり、安定トランスフェクションは長期間にわたり外来DNAを導入細胞およびその子孫に維持することを可能とします。このように、安定トランスフェクションは、複数世代にわたり導入された遺伝子を持続的に発現させることを可能とします。これは、組換えタンパク質の生産、あるいは外来DNA発現の下流や長期的影響の解析に有用です。しかしながら、通常、安定的に導入細胞のゲノムに組み込まれるのは、1または2～3コピーの外来DNAです。このため、安定的に導入された遺伝子の発現レベルは、一過的に導入された遺伝子の発現レベルよりも低い傾向があります。外来...安定トランスフェクション
一過性トランスフェクションのページを更新一過性トランスフェクションでは、導入された核酸は限られた期間だけ細胞内に存在し、ゲノムには組み込まれません。このように一過的に導入された遺伝物質は細胞分裂を介して世代から世代へと受け継がれることはなく、環境因子によって失われるか、細胞分裂を通して希釈されます。しかしながら、高コピー数で導入される遺伝物質は、その期間、高レベルの発現タンパク質を細胞内に存在させることにつながります。使用するコンストラクトによりますが、一過的に発現される導入遺伝子は一般的に1～7日間にわたり検出され、一過的に導入された細胞は通常トランスフェクション後24～96時間以内に回収されます。遺伝子産物を解析するためには、酵素活性アッセイや免疫アッセイに使用するためのRNAやタンパク質を分離するこ...一過性トランスフェクション
RNAトランスフェクションのページを更新RNAを細胞にトランスフェクトして、コードされたタンパク質を一時的に発現したり、RNAの分解速度を調べることも可能である。RNAトランスフェクションは、分裂しない初代細胞でよく使用される。siRNAをトランスフェクトして、RNAサイレンシング（すなわち、標的遺伝子からのRNAおよびタンパク質の消去）を行うことも可能である。siRNAのトランスフェクトは、特定タンパク質（例えば、エンドセリン-1）の遺伝子ノックダウンの研究に使用され、遺伝子治療の実現に向けて応用が進んでいる。RNAサイレンシングの限界として、細胞に対するトランスフェクションの毒性と、他の遺伝子/タンパク質が発現してしまう潜在的な「オフターゲット」効果がある。＜出典：Wikipedia＞⇒トランスフェク...RNAトランスフェクション
トランスフェクション（transfection）のページを更新トランスフェクション（transfection）とは核酸を動物細胞内へ導入する過程を指す。通常、動物細胞はウイルスによる導入以外は核酸の細胞内導入は滅多に起こらないが、人為的にある程度自由に核酸を導入する事が可能になってきている。広義では、トランスフェクションとは、ウイルス感染以外の方法で核酸（DNAまたはRNA）を細胞に人為的に導入するプロセスを意味します。このような外来核酸の導入には様々な化学的手法、生物学的手法、または物理的手法が用いられ、それによって細胞の特性が変化することで、遺伝子機能および細胞内におけるタンパク質の発現に関する研究が可能になります。トランスフェクションには、導入された核酸は細胞内に一過的に存在し、限られた期間のみ発現...トランスフェクション（transfection）
